人体结构:研究正常人体结构的方法

五、研究正常人体结构的方法



(一)大体解剖学的研究方法



研究大体解剖学采用古老式的方法,即持刀剖割,肉眼观察。



(二)组织学的研究方法



组织学的研究方法有光学显微镜术、电子显微镜术、组织化学技术等。



1.光学显微镜术包括普通光学显微镜术和特殊光学显微镜术。



(1)普通光学显微镜术:它是使用光学显微镜来观察细胞、组织的微细结构。观察时需要把组织制成能使光线通过的切片,最常用的是石蜡切片技术。



1)石蜡切片技术:其过程大致如下。①取材、固定:把新鲜的组织块迅速放入固定液(如10%甲醛溶液)中固定,可使组织尽可能保持活体时的结构状态。②脱水、透明、包埋:用不同浓度的乙醇对组织块进行脱水,用二甲苯进行透明后,包埋到石蜡中形成较硬的组织蜡块。③切片、染色:用切片机把组织蜡块切成5~7μm的薄片,贴于载玻片上,脱蜡后进行染色,然后用树胶加盖玻片封固即可观察。



组织切片常用染色方法是苏木素 (hematoxylin)-伊红 (eosin)染色,简称HE染色。苏木素是一种碱性染料,可将细胞内某些成分染成紫蓝色,凡与苏木素亲和力强的物质称为嗜碱性物质;伊红是一种酸性染料,可将细胞内某些成分染成红色,与伊红亲和力强的物质称为嗜酸性物质;介于两者之间的则为中性。



2)其他切片技术:①冰冻切片:在低温下将组织块迅速冷冻直接切片,多用于检测酶和快速病理诊断。②涂片:一些液体组织(如血液、骨髓、腹水)可直接涂于载玻片上进行观察。③铺片:一些柔软组织(如疏松结缔组织)可将其撕成薄膜铺在载玻片上。④磨片:把一些坚硬的组织(如骨、牙等)磨成薄片贴在载玻片上。



(2)特殊光学显微镜术:有时根据研究对象和内容的不同,需要使用特殊显微镜,如荧光显微镜、倒置相差显微镜、激光共聚焦扫描显微镜等。



2.电子显微镜术其成像原理和光学显微镜相似,用电子束代替可见光,用磁透镜成像,分辨率比光镜高1000倍。常用的电镜有两种:①透射电镜:主要用于观察细胞内部的超微结构。观察时需要制备比光镜切片更薄的超薄切片(厚50~100nm)。②扫描电镜:主要用于观察细胞、组织或器官表面的立体结构。



3.组织化学技术用物理和化学原理、技术与组织学技术相结合,对细胞中某种物质存在的数量、分布状况进行定性、定位分析研究的技术。有一般组织化学技术、免疫组织化学技术和荧光组织化学技术等。



4.其他研究技术如放射自显影技术、组织培养技术、组织工程技术和图像分析技术(又称形态计量技术)等。

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吾生也有涯,而知也无涯。——庄子